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技術文章
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技術文章
2023-327
各種微生物由于遺傳特性不同，因此適合采用的保藏方法也不一樣。一種良好的有效保藏方法，首先應能保持原菌種的優良性狀長期不變，同時還須考慮方法的通用性、操作的簡便性和設備的普及性。下面介紹幾種常用的菌種保藏方法：1.斜面低溫保藏法將菌種接種在適宜的斜面培養基上，待菌種生長完成后，置于4℃左右的冰箱中保藏，每隔一定時間（保藏期）再轉接至新的斜面培養基上，生長后繼續保藏，如此連續不斷。此法廣泛適用于細菌、放線菌、酵母菌和霉菌等大多數微生物菌種的短期保藏及不宜用冷凍干燥保藏的菌種。放線...
查看更多2023-38
培養基作為細胞的“食物”，是細胞培養和發酵的基礎，大腸桿菌在不同的培養基中培養可能會表現出不同的性狀，而利用這些性狀的不同，可將部分菌種進行區分或分離，此外，根據目標菌種選擇合適的培養基可以低成本、穩定的高表達。大腸桿菌分離培養基常見的主要有以下幾種：大腸桿菌分離培養基：主要根據不同的大腸桿菌在培養基中的生產速度，代謝產物，對培養基中特定組分的需求利用情況不同等實現對不同種類的菌種進行分離或篩選。LB固體培養基：是一種主要組分為酵母提取物、胰化蛋白胨、NaCl瓊脂的非選擇性固...
查看更多2023-38
發酵工程培養基主要使用發酵培養基：發酵培養基是指為了在生產中更加利于菌種代謝產物的生成而設計的培養基，這類培養基常見的主要有以下幾種：SOB（SuperOptimalBroth）培養基：是一種富營養培養基，其配方為：2%胰蛋白胨,0.5%酵母提取物,10mMNaCl,2.5mMKCl,10mMMgCl2,10mMMgSO4。與LB培養基相比，SOB培養基中含有兩倍多的蛋白胨，富含更多的氨基酸及多肽。此外，SOB培養基中含有鎂離子，鎂離子是高密度培養必須的離子。利用SOB培養基...
查看更多2023-32
2023-32
本文主要介紹4種Transwell實驗的實驗步驟，具體包括：Transwell腫瘤細胞遷移實驗、Transwell上皮細胞培養實驗、TranswellB16細胞的體外遷移實驗、Transwell內皮細胞HMEC-1遷移實驗。一、Transwell腫瘤細胞遷移實驗過程與Transwell侵襲實驗基本一致，不同的只是不需要鋪Matrigel。由于沒有基質膠的阻擋，細胞穿過膜的速度較侵襲實驗明顯加快，所以細胞量要更大。我做侵襲實驗的細胞密度是1×10°，而遷移實驗的密度是1×10°...
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